DNA RECOMBINANTE

Ejemplos de DNA recombinante, es aquel que no se da a partir
de técnicas moleculares

 recombinación en la reproducción viral

- recombinación por transformación bacteriana

- cambio de clase de inmunoglobulinas

- conversión génica

- recombinación no homóloga

Bibliografía:

http://es.scribd.com/doc/70708591/Recombinacion-genetica

Prueba de Hibridación o Secuenciación para Diabetes Mellitus

Southern

El método tipo Southern o Southern blot fue desarrollado para la detección de genes específicos en el ADN celular. El ADN es digerido con una enzima de restricción y los fragmentos son separados por tamaños mediante electroforesis en un gel. A continuación los fragmentos de ADN de doble cadena son desnaturalizados mediante un proceso químico separando las dos hebras componentes del ADN en sus cadenas sencillas. Posteriormente, el ADN inserto en el gel es transferido a un filtro de nitrocelulosa, con lo que en el filtro queda representada una réplica de la disposición de los fragmentos de ADN presentes en el gel. A continuación el filtro se incuba durante un tiempo con la sonda marcada (radiactivamente o con un fluorocromo); durante la incubación la sonda se va hibridando con las moléculas de ADN de cadena sencilla de secuencia complementaria (o muy parecida). La sonda unida al fragmento de ADN complementario se puede visualizar en el filtro de una forma sencilla mediante una exposición a una película de rayos X para el caso de sondas radiactivas o con una película sensible a la luz, para el caso de sondas con fluorocromo.

Bibliografía:

http://www.sediabetes.org/gestor/upload/revista/00001975archivorevista.pdf#page=5

Trabajo de investigación PCR para Diabetes

ANÁLISIS DE ARTÍCULO PCR RELACIONADO CON DIABETES

TEMA: Asociación del SNP19 del gen «calpaína 10» a diabetes mellitus tipo 2 y factores de riesgo en población peruana

OBJETIVO: detectar estas asociaciones en la población diabética peruana.

MUESTRA: Sangre periférica

ÁCIDO NUCLÉICO: ADN genómico

GEN: SNP 19 (intrón 6)

PCR: Estándar -35 ciclos

D: 94ºC por 30s

H: 60ºC por 30s

E: 72ºC por 30s

Visualización: Electroforésis

CN y C-: agua 
FP: si p >0,05
FN: si p <0,05

REFERENCIA DEL ARTÍCULO

http://es.slideshare.net/paulinaarmas3/pcr-en-diabetes-mellitus

EPIGENETICA

EPIGENÉTICA EN DIABETES MELLITUS

Epigenética: se define: "como el estudio de los cambios en la función de los genes que son heredables por mitosis/meiosis, que no importan una modificación en la secuencia del ADN y que pueden ser reversibles".

Las modificaciones epigenéticas se cumplen a través de tres mecanismos básicos.

 La metilación de la citosina en los pares de nucleótidos citosina-guanina del ADN. La metilación 5" de la citosina en residuos CpG de los dinucleótidos de ADN ocurre en la mitosis como parte de la diferenciación celular. Un ejemplo en mamíferos femeninos es el caso del cromosoma X. Uno de los dos se inactiva apenas iniciado el desarrollo, mientras que el otro continúa activo. Este fenómeno responde a un proceso de metilación-demetilación. Se sabe hoy que la metilación se cumple en etapas posteriores a la mitosis también. De esa manera, se afirma que un cambio epigenético por metilación, puede ocurrir en células que no se están dividiendo, peo también en aquellas que no se dividen (neuronas). 16

La acetilación de las histonas (proteínas que "empaquetan" la cromatina) genera una modificación sobre la cromatina, la cual puede cambiar su densidad y permitir, mediante este proceso, el acceso a los genes y su expresión. Metilación y acetilación son mecanismos que se suceden coordinadamente como sucede durante la descondensación de la cromatina y la demetilación del pronúcleo masculino en el cigoto fecundado.16

El tercer mecanismo tiene lugar a través de los recientemente descubiertos micro ARNs que son pequeños fragmentos de ARN no codificadores pero de mucha importancia en la activación y desactivación de los genes y en la organización de la cromatina. Este mecanismo también parece ser sinérgico con los dos anteriores.17 En conjunto, estos procedimientos epigenéticos permiten al organismo en desarrollo producir fenotipos celulares diferentes y estables a partir del mismo genotipo.

BIBLIOGRAFÍA:

http://www.monografias.com/trabajos86/epigenetica-diabetes-perinatal/epigenetica-diabetes-perinatal.shtml

ALTERACIONES EN LA TRADUCCIÓN DEL ADN EN LA DIABETES MELLITUS

El dogma de la genética consiste en que el ADN de los genes se transcribe a ARN mensajero (ARNm) que después es traducido a proteínas.

El factor de transcripción nuclear kappa-beta regula la expresión de genes que codifican proteínas proinflamatorias, claves en el desarrollo de la placa de ateroma, y que en el estado de resistencia a la insulina existen múltiples factores activadores que pueden explicar la precocidad y severidad del proceso aterogénico.
Las glitazonas, un nuevo grupo de antidiabéticos orales, son agonistas de otro factor de transcripción nuclear, el receptor activado del peroxisoma proliferador. De manera experimental, estos agentes han demostrado mejorar la sensibilidad periférica a la insulina y retardar la progresión de la aterosclerosis, posiblemente debido, entre otros mecanismos, a su efecto antiinflamatorio.

Existen otras formas de ARN, como el ARN ribosómico (ARNr) o el ARN de transferencia (ARNt), que catalizan reacciones biológicas, controlan la expresión de genes o interaccionan con cascadas de señalización dentro de las células.




Bibliografía:

*http://articulos.sld.cu/diabetes/2012/08/28/los-cientificos-identifican-nuevas-regiones-geneticas-relacionadas-con-la-diabetes-tipo-2/

http://www.revespcardiol.org/es/diagnostico-clasificacion-patogenia-diabetes-mellitus/articulo/13031154/

http://blog.hospitalclinic.org/es/2012/10/nou-tipus-arn-relacionat-amb-diabetis/

Alteraciones en la Transcripción relacionadas con la Diabetes Mellitus

Alteraciones en la Transcripción relacionadas con la Diabetes Mellitus

La Diabetes MODY se presenta debido a alteraciones en los factores de transcripción hepatonucleares, los cuales cumplen un papel clave en el desarrollo y proliferación de células beta del páncreas, así como en el metabolismo de la célula beta madura.

Existe una importante interacción 
entre estos factores de transcripción,
 que forman una cadena reguladora
 que mantiene la función de la 
célula beta y, por tanto, la normalidad
 de la homeostasis de la glucosa; 
sus alteraciones causan una disfunción
 progresiva de dicha célula.
 Las mutaciones que se producen
 en estos factores de transcripción 
llevan a un patrón similar de disfunción
de la célula beta, con una diabetes
de características clínicas semejantes
pero distintas asociaciones extrapancreáticas.

 Los sujetos con mutaciones en los factores de transcripción nacen normoglucémicos
; la hiperglucemia aparece posteriormente y es progresiva, llegando a diabetes
 franca en la adolescencia o en la vida adulta. Casi todos los pacientes
 terminan por requerir tratamiento farmacológico.
 Si la enfermedad no se trata de manera adecuada, son frecuentes las complicaciones crónicas.

Dos de los MODY están causados por mutaciones en genes que
 codifican enzimas: el MODY 2 (consecuencia de alteraciones
 en el gen que codiÞ ca la GCK)24 y el MODY 7
 (por mutaciones en el gen de la carboxil éster lipasa [CEL] CEL VNTR)23.
 Los otros cinco genes implicados codifican factores de
 transcripción de la célula beta25: 
el factor promotor de insulina 1 (IPF-1) (MODY 4), los genes HNF-1a

(MODY 3), 4a (MODY 1) y 1b (MODY 5) –que se expresan en el hígado
 y en los islotes pancreáticos y desempeñan
 un papel fundamental en la normalidad del desarrollo y la función de las células beta25–, y el NeuroD1/BETA2 (MODY 6), que interviene en el desarrollo pancreático y en la transcripción del gen de la insulina.

El mecanismo preciso por el cual las mutaciones de los factores de transcripción producen la diabetes no es totalmente conocido.

Específicamente los tipos de diabetes monogénica presentan alteración en estos factores de transcripción:

MODY 1

Se produce por mutaciones heterocigotas en el gen del HNF-4a,

 un factor de transcripción de la familia de los receptores nucleares de hormonas tiroideas-esteroideas.

Este gen desempeña un papel decisivo durante la diferenciación celular, el desarrollo embrionario y el metabolismo, y es fundamental para el correcto funcionamiento de los islotes pancreáticos

el hígado y el riñon.

MODY 2

Mutación en la glucocinasa (GCK) (Gen que codifica enzimas)

MODY 3

Se presenta debido a mutaciones en el gen HNF-1a, que pertenece a la familia de 

factores de transcripción con un homeodominio para su unión al ADN.

 Se expresa en hígado, riñón, intestino e islotes pancreáticos.

MODY 4

Es un subtipo poco frecuente de MODY causado por mutaciones en el gen IPF-144. 

Este gen pertenece a la familia de los factores de transcripción que poseen un 

dominio de unión al ADN, y es necesario para el desarrollo del páncreas y 

la expresión del gen de la insulina.

MODY 5

Secundario a mutaciones heterocigotas en el factor de transcripción hepatonuclear 1b.

MODY 6

Se manifiesta por una mutación del gen NeuroD1 / BETA2, un factor de

 transcripción con un dominio de unión al ADN importante para 

determinar el tipo celular durante el desarrollo embrionario.

MODY 7

Mutaciones en CEL VNTR (Gen que codifica enzimas)

Bibliografía:

http://www.sediabetes.org/gestor/upload/revistaAvances/23-5.pdf#page=15

http://www.seep.es/privado/documentos/consenso/cap25.pdf

ALTERACIONES EN LA REPLICACIÓN EN LA DIABETES MELLITUS TIPO II

ALTERACIONES EN LA REPLICACIÓN DE DIABETES TIPO 2

La Diabetes Mellitus tipo II es una entidad clínica y genéticamente heterogénea. Mutaciones en el gen de la glucocinasa y de los factores transcripcionales HNF-1a, HNF-4a, IPF-1, HNF-1b y HNF-3b han sido demostradas como causa de la diabetes tipo MOD.

Las personas con ciertos raros tipos de diabetes tipo 2 tienen diferentes riesgos. Los hijos de padres con una rara forma llamada diabetes juvenil de inicio en la edad adulta (MODY,maturity-onset diabetes oftheyoung), tienen una probabilidad casi del 50% de padecerla también.

Mutaciones en estos genes resultan en un defecto en la síntesis o la secreción de insulina. Cinco de estos genes codifican para factores transcripcionales positivos del gen de insulina y otros genes específicos de la célula b. Mutaciones en alguno de los genes asociados a MODY podría contribuir o determinar la insuficiencia en la síntesis o secreción de insulina observadas frecuentemente en los individuos que desarrollan diabetes a una edad temprana.

Replicación normal del ADN

Bibliografía:

http://themedicalbiochemistrypage.org/es/diabetes-sp.php

http://www.diabetes.org/es/informacion-basica-de-la-diabetes/aspectos-genticos-de-la-diabetes.html

http://www.medicina21.com/doc.php?op=especialidad3&id=1805

https://www.idf.org/sites/default/files/attachments/article_16_es.pdf

SCREENING Y PRUEBA CONFIRMATORIA DE DIABETES

SCREENING 

Un análisis de orina puede mostrar hiperglucemia; pero un examen de orina solo no diagnostica la diabetes. El médico puede sospechar que usted tiene diabetes si su nivel de azúcar en la sangre es superior a 200 mg/dL. Para confirmar el diagnóstico, se deben hacer uno o más de los siguientes exámenes: Exámenes de sangre: Glucemia en ayunas: se diagnostica diabetes si el resultado es mayor a 126 mg/dL en dos oportunidades. Los niveles entre 100 y 126 mg/dL se denominan alteración de la glucosa en ayunas o prediabetes. Dichos niveles se consideran factores de riesgo para la diabetes tipo 2. Examen de hemoglobina A1c: Normal: menos de 5.7% Prediabetes: entre 5.7% y 6.4% Diabetes: 6.5% o superior Prueba de tolerancia a la glucosa oral: se diagnostica diabetes si el nivel de glucosa es superior a 200 mg/dL luego de 2 horas de tomar una bebida con glucosa (esta prueba se usa con mayor frecuencia para la diabetes tipo 2). Las pruebas de detección para diabetes tipo 2 en personas asintomáticas se recomiendan para: Niños obesos que tengan otros factores de riesgo de padecer diabetes: se comienza a la edad de 10 años y se repite cada dos años. Adultos con sobrepeso (IMC superior a 25) que tengan otros factores de riesgo. Adultos de más de 45 años; se repite cada tres años.

Con el tiempo se pueden desarrollar enfermedades como: Enfermedad Celiaca, Alteraciones Tiroideas, Enfermedades Adrenales, retinopatía diabética, etc.

RETINOPATÍA DIABÉTICA 

PRUEBA CONFIRMATORIA

Versión para imprimir

HEMOGLOBINA GLICOSILADA A1C

Es un examen de laboratorio que muestra el nivel promedio de azúcar (glucosa)
en la sangre durante los últimos tres meses. Este examen muestra qué tan bien
está controlando usted la diabetes. 

Procedimiento

Se necesita una muestra de sangre. Hay disponibilidad de dos métodos:

• Sangre que se extrae de una vena (venopunción). Esto se hace en un laboratorio.
• Punción en el dedo. Esto se puede hacer en el consultorio médico o le pueden
•  recetar un equipo que usted puede usar en casa.

El médico puede ordenar este examen si usted tiene diabetes.
 El examen muestra qué tan bien está controlando usted su diabetes.

El examen también se puede emplear para detectar si hay diabetes.

Valores Normales

Los siguientes son los resultados cuando el HbA1c se usa para diagnosticar diabetes:

• Normal (no hay diabetes): menos de 5.7%
• Prediabetes: 5.7 a 6.4%
• Diabetes: 6.5% o más
  

Web Grafía:

http://www.semergenandalucia.org/docs/libroDiabetes.pdf#page=22

http://www.medigraphic.com/pdfs/evidencia/eo-2010/eo101f.pdf

http://diabeteshospitalcordoba.com/2013/03/04/hemoglobina-glicosilada-hba1c-diagnostico-y-control-del-paciente-con-diabetes/

DIABETES

La diabetes es una enfermedad crónica que aparece debido a que el páncreas no fabrica la cantidad de insulina que el cuerpo humano necesita, o bien la fabrica de una calidad inferior. La insulina, es una hormona producida por el páncreas, una glándula que posee en su estructura islotes de langerhans (cúmulo de células secretoras) y más profundamente, las células Beta de los islotes producen la insulina; que es la principal sustancia responsable del mantenimiento de los valores adecuados de azúcar en sangre. Permite que la glucosa sea transportada al interior de las células, de modo que éstas produzcan energía o almacenen la glucosa hasta que su utilización sea necesaria. Cuando falla, origina un aumento excesivo del azúcar que contiene la sangre (hiperglucemia) y conjuntamente se da un aumento de dicha hormona (hiperinsulinemia). De hecho, el nombre científico de la enfermedad es diabetes mellitus, que significa "miel".
Con el tiempo, el exceso de glucosa en la sangre puede causar problemas serios

Web Grafía:
http://www.idf.org/diabetesatlas/5e/es/que-es-la-diabetes
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/diabetes.html
http://www.dmedicina.com/enfermedades/digestivas/diabetes

Es un grato placer para mi persona contar con su visita; este es un sitio dedicado a la Biología Molecular, que con bases en el conocimiento científico, servirá como una herramienta para el estudio de la Medicina, agradezco su tiempo dedicado a este sitio, esperando que sea de su completo agrado.